Publié : 19 décembre 2012
Format PDF Enregistrer au format PDF

L’extraction d’ADN.

Savoir suivre un protocole. Faire preuve d’autonomie.

- Comprendre les étapes de l’extraction de l’ADN.

Réaliser l’extraction de l’ADN en suivant le protocole ci-dessous et en utilisant le matériel à disposition.

Matériel nécessaire par groupe

JPEG - 93.7 ko
Matériel

- Un mortier et un pilon
- du sel, un bécher avec du liquide vaisselle, une cuillère
- un entonnoir, une gaze, un tube à essai, un portoir
- une pipette, un flacon d’alcool à brûler
- un agitateur en verre
- une éponge

Protocole d’extraction

  • 1) Dans un mortier, broyer l’être vivant distribué avec une cuillère de sel et 2 cuillères d’eau prise au robinet. Broyer au moins deux minutes.
JPEG - 89.4 ko
Extraction ADN : Kiwi
JPEG - 89.3 ko
Extraction ADN : oeufs de lompe
JPEG - 88.2 ko
Extraction ADN : banane
  • 2) Ajouter une cuillère de produit vaisselle. Mélanger doucement, environ une minute. Le mélange doit être homogène.
  • 3) Verser le mélange sur un filtre posé sur un entonnoir placé au-dessus d’un tube à essai. Recueillir 2 à 3 cm de liquide dans le tube. Vous ferez attention à ne pas trop remplir l’entonnoir.
JPEG - 161.5 ko
Extraction ADN : filtrage
JPEG - 160.5 ko
Extraction ADN : filtrage
L’utilisation de la gaze est à privilégier.
  • 4) Poser le filtre dans la poubelle. Nettoyer le pilon et le mortier, les renverser dans le bac pour qu’ils sèchent.
  • 5) Prendre de 4 à 5 ml d’alcool dans le flacon à l’aide de la pipette (appuyer sur la poire puis relâcher pour aspirer l’alcool dans la pipette). Faire couler l’alcool dans le tube à essai très doucement. L’alcool doit toucher le tube et former une couche d’environ 2 cm au dessus de la préparation.
  • 6) Vous pouvez alors observer l’ADN qui forme un précipité blanc dans l’alcool.
JPEG - 156.1 ko
Extraction ADN : la molécule d’ADN surnage dans l’alcool
JPEG - 116 ko
Extraction ADN : pour la banane
JPEG - 152 ko
Extraction ADN : pour les oeufs de lompe
JPEG - 207.9 ko
Extraction ADN
  • 7) Une goutte de vert de méthyle peut être ajoutée pour mieux visualiser la molécule d’ADN ainsi extraite.
  • 8) Nettoyer le tube à essai puis le renverser sur le portoir. Nettoyer l’entonnoir. Remettre tout le matériel.

En plus

- Voir de belles images de cette manipulation sur ce site de SVT

Répondre à cet article

6 Messages